组织研磨仪本质是二维振动球磨仪，是通过振动的方式来实现对样品的粉碎研磨。其工作区域安装有两个可高频次振动(每分钟可达1500次)的摇臂，摇臂形似机械手，可放置球磨罐或研磨适配器。

　　设备工作时，两只摇臂作"∞"形运动，即水平摆动，其带动球磨罐内部的研磨球，赋予其动能，研磨球在容器内进行高频次、无规则的运动，实现对样品的撞击和挤压，完成粉碎和研磨。

 

　　二、组织研磨仪详细的操作步骤如下：

　　1、在离心管中加入样品、研磨球、裂解液（可省），盖上盖；

　　2、将装好样品的离心管放入适配器中；

　　3、将适配器及装有样品的离心管浸入液氮中进行预冷冻；

　　4、将适配器装到主机上，锁紧固定装置；

　　5、观赏防护罩，按需求设定好参数后，开始研磨；

　　6、等仪器*停止振动后关机，打开安全门，取出样品；

　　7、仪器归位。
 

　　三、工艺技术：

　　1、平整度：

　　工件的平整度取决于磨盘的平整度。随着加工领域的不断深化及精度和效率要求越来越高：“WEIANDA”从铸铁盘、合成盘、铜盘、纯锡盘、树脂盘发展到金刚石盘，并通过各种方法把盘的平面订修到佳达2um。

　　2、粗糙度：

　　表面粗糙度取决于磨料颗粒的大小、形状和磨盘的材料， 以及工件材质及硬度。

　　3、粗磨：

　　利用较粗颗粒度的磨料在磨盘与工件面上磨削，进刀量大、效率高；但磨削面较粗，适用于磨削余量较多之工作。

　　4、中磨：

　　利用中度颗粒的磨料在磨盘与工件面上磨削，进刀量快、效率高，表面粗糙度适中，适合磨削量一般之工件。

　　5、精磨：

　　利用较细颗粒度的磨料在磨盘中与工件面上磨削，进刀量较小、表面光洁度好，磨削痕均匀而细。

　　6、软抛光：

　　利用磨盘上加装一个特殊材料抛光垫或抛光布，抛光料在抛光垫或抛光布之间运动，使工件比硬抛光更有超镜子一样的高光洁度。

　　7、硬抛光：

　　利用合成盘、铜盘、锡盘、树脂盘等非常高精密度的基面加入微米级金刚石磨料，使工件表面变得既高精密平面度，又有像镜子一样的高光洁度。
 

　　四、组织研磨仪的使用方法：

　　1、将仪器放置在干燥通风的环境中，插上电源，观察仪器控制显示器是否正常亮灯。打开仪器，测试控制按钮是否能正常使用，仪器空载运行时是否有异响。

　　2、将适量样品和研磨球放入球磨罐中，预留一定的研磨空间。初次研磨建议保持样品和研磨球各占球磨罐容积的三分之一。

　　3、若需要预冷冻，可将装有样品的球磨罐放入液氮环境中冷却3分钟以上，然后再装入仪器进行研磨。使用液氮进行预冷冻时，应做好防护措施，防止被冻.伤。

　　4、将球磨罐放入高通量组织球磨仪的夹具内，慢慢转动转轮，依靠自动定位的紧固装置固定好球磨罐，盖上盖子。

　　5、在控制显示器上设定好研磨仪的运行时间和摆动频次，开始研磨。研磨完成后，转动转轮取下球磨罐。
 

　　组织研磨仪可对硬性、中硬性和脆性样品进行细粉碎和精细研磨，还适用于软性、弹性、纤维质材料的研磨前处理。既可干磨，也可湿磨，还可进行冷冻低温研磨，在农业、生物医药、食品、地质化工、环境、质检、高校科研等多个行业的实验室都有广泛应用。
 

　　五、 实验试剂：

　　1.CTAB抽提液：

　　2%（w/v）CTAB

　　100 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)

　　20 mmol/L EDTA(pH8.0)

　　1.4 mol/L NaCl

　　抽提含多酚较多的植物材料时（比如木本植物），上述抽提液中可另加入2%的PVP（聚乙烯吡咯烷酮）。

　　抽提液于室温保存，可在几年内保持稳定。临用之前向装有上述抽提液的试管中加入约2%-3%（v/v）的β-巯基乙醇。

　　2、醋酸钠：

　　3 mol/L NaAc

　　用冰乙酸调pH值至4.8-5.2。

　　3、TE溶液：

　　4、其它：

　　无水乙醇，异丙醇，75％乙醇，酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），氯仿：异戊醇（24：1），β-巯基乙醇，重蒸水。
 

　　六、 实验步骤

　　1. 样品研磨

　　1) 取1g的样品放入2ml ep管中

　　2) 加入1-2粒5mm研磨珠

　　3) 加入1ml的CTAB 抽提液

　　4) 将加有样品的ep管放入高通量组织研磨仪的适配器中，盖好

　　5) 将研磨转速调到1800，设定研磨时间为90秒（可根椐样品的研磨的难易程度来调节，此数据是以银杏落叶为样本得出）

　　6) 启动研磨仪对样品进行研磨（根据不同的样品，本身性质不同，需要对研磨频率和研磨时间进行适当的调整）

　　2. DNA的粗提

　　1) 将研磨好的样品取出于65℃水浴45min，中途间隔（轻柔）振荡三次混匀

　　2) 冷却后加入等体积氯仿：异戊醇（24：1），轻柔颠倒混匀使乳化10min

　　3) 7000g-8000g离心10min（18-20℃）

　　4) 吸取上清于另一干净的离心管中

　　5) （根据需要可用氯仿：异戊醇如上法重复抽提一次，吸取上清）

　　6) 加入与上清液等体积（且已于-20℃预冷的异丙醇，颠倒混匀，约1至2分钟后应有白色絮状沉淀出现（若没有，则加入上清液1/5至1/10体积的pH4.8-5.2的3M NaAc,混匀，于－20℃冰箱中沉淀30min）

　　7) 离心法沉淀DNA

　　8) 在75%乙醇中漂洗DNA数分钟以上，用Tip头吸干乙醇

　　9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次

　　10) 沉淀于室温或64℃以下的恒温箱中干燥片刻至刚出现半透明，不要过度干燥

　　11) 用50μlTE溶解沉淀，可用65℃水浴助溶，DNA粗提物可用于粗略PCR等。

　　3. DNA的纯化

　　1) 向TE溶解的DNA粗提物中入4-10μl RNaseA(约40-100μg)

　　2) 于37℃酶解RNA 1hr或65℃酶解RNA 30min以上

　　3) 加入50μl酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），轻轻颠倒混匀10min

　　4) 10000g以上常温离心10min，吸取上清

　　5) 加入50μl仿氯：异戊醇（24：1）轻轻颠倒10min

　　6) 10000g以上常温离心10min，吸取上清 (根据需要可重复用氯仿：异戊醇如上法再抽提1-2次，以充分去除蛋白和酚)

　　7) 向上清中加入1/5-1/10体积的pH4.8-5.2的3M NaAc,并加入2.5倍体积无水乙醇，于－20℃沉淀30min以上

　　8) 12000g、4℃低温离心10min,吸干液体

　　9) 沉淀用75％乙醇漂洗二次

　　10) 沉淀于室温或64℃以下恒温箱中干燥片刻至刚开始出现半透明状，勿过度干燥加入50μl重蒸水溶解DNA，可于65℃水浴助溶

　　11) 取5μl DNA电泳检查DNA的质量

　　12) 100-500倍稀释后于分光光度计上测定OD260及OD280，分析DNA的浓度和质量

　　13) 保存DNA于-20℃

　　补充：如果需要提取的样品比较多（比如1g），研磨好的样品在后续的提取中，需要转移到大的epp管中，研磨时可以加入较少的抽提液，研磨完毕按照1g样品10ml提取液补充抽提液，进行后续的操作。